
實驗選取10只清潔健康雄性成年(3~4月)SD大鼠為成年組,體質量300~350 g;另選取20只清潔級健康雄性高齡(18~20月)SD大鼠,體質量480~600 g,隨機分成2組,高齡組(n= 10 )和飽和氫氣鹽溶液組(H組,n = 10 )。將高壓氫氣(輸出壓力.4 M Pa)通入.9%氯化鈉6 h以達到飽和,滅菌 ,4攝氏度保存。成年組及高齡組 以 5 m L·kg~d-1 。生理鹽水灌胃,H 組以5 m L·kg~d-1 飽和氫氣鹽溶液灌胃,其他條件等同。8周后,收集所有大鼠腎臟組織 。
與成年組相比,高齡組SOD活力明顯降低,丙二醛和8-OHdG的含量明顯升高;與高齡組相比,H組SOD活力明顯升高,丙二醛和8-OHdG明顯降低。
正常細胞內存在清除自由基的防御系統 ,如SOD、過氧化氫酶、谷胱甘肽過氧化物酶、維生素E、醌類物質等電子受體。它們的主要功能是及時清除機體生成的過量自由基,以防止其對組織細胞產生毒害作用。SOD是其中最重要的一種,可以使超氧陰離子自由基發生歧化反應 ,從而消除其對機體的氧化損傷。而自由基誘導的DNA損傷主要是指DNA鏈上的鳥嘌呤堿基C一8位受到羥自由基及單線態氧的攻擊而發生羥化 ,生成加合物8-OHdG,使DNA受損,復制代謝能力降低 ,最終導致衰老。
SIRT1基因在能量限制(caloric restriction,CR )中發揮抗衰老作用,故被認為是長壽基因。SIRT1通過參與調節細胞的增殖、分化、代謝、凋亡和衰老。增強細胞的氧化應激和抗凋亡能力,參與細胞壽命的延長。抑制凋亡的進行,進而促進細胞的生存,延長其壽命。本實驗結果顯示,與成年組相比,高齡組腎臟SIRT1的表達顯著降低 ;而H組SIRT1的表達較高齡組增高了5倍多,說明隨著年齡的增加,SIRT1的表達伴隨衰老的進行呈現出下降趨勢,而飽和氫氣鹽溶液可上調SIRT1的表達,起到一定的抗衰老作用。
綜上所述,本研究表明,隨著年齡的增長,腎臟出現衰老的表現 ,如SOD活性降低,丙二醛、8-OHdG量升高 ,對抗自由基能力下降,脂質過氧化產物增加,細胞DNA受到損傷,而飽和氫氣鹽溶液能夠顯著改善上述情況,其抗衰老作用可能與影響p53,p16,SIRT1的表達有關。